細胞的體外培養檢測產品生物性能

1.實驗目的：

通過細胞的體外培養來檢測產品的生物性能是否達到要求。

2.實驗原理：

體外培養的細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭，將培養的細胞分散，從容器中取出，以1:2或l:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養，即為傳代培養。通過貼壁細胞的傳代培養，觀察細胞的生長狀態可以反映出培養產品是否達到細胞培養的要求。

3.實驗材料：

3.1 抽檢樣品：

3.2 細胞株：VERO細胞系：*貼壁細胞，主要用于接種病毒的一種細胞。

3.3 實驗試劑：RPMI1640（8111031）、0.25%胰酶（876536）、小牛血清（8187648）、都購自廣州英韋創津生物試劑公司。

3.4 實驗耗材：3ml的巴斯德吸管、酒精燈、鑷子、酒精棉球。

3.5 實驗儀器：XDS-1倒置顯微鏡購自廣州粵顯光學儀器科技有限公司；

超凈工作臺購自蘇州凈化儀器設備公司；

4.實驗步驟：

4.1. 在倒置顯微鏡下觀察細胞形態和密度，取生長良好的細胞若干瓶，棄掉舊培養液。

4.2. 加入胰酶消化細胞，消化適度后倒去胰酶。

4.3. 加入適量培養液反復吹打數次。

4.4. 細胞計數稀釋細胞密度為1×10⁵/ml

4.5. 將細胞接種于抽檢樣品中：

5.實驗結果：

1、Vero細胞培養24小時后10×10倍下圖片

2、Vero細胞培養48小時后10×10倍下圖片

3、細胞計數

6.結果判定

這次抽檢樣品做細胞培養檢測，細胞生長狀態正常，貼壁生長良好，10%血清培養液培養，細胞增長率符合企業標準。